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凝胶层析原理

2025-10-07 18:29:42

问题描述:

凝胶层析原理,真的撑不住了,求高手支招!

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2025-10-07 18:29:42

凝胶层析原理】凝胶层析,又称凝胶过滤层析或排阻层析(Gel Filtration Chromatography),是一种基于分子大小差异进行分离的色谱技术。其基本原理是利用多孔凝胶颗粒作为固定相,样品中不同大小的分子在通过凝胶柱时,因进入凝胶孔隙的能力不同而被分离开来。较大的分子无法进入孔隙,直接通过凝胶颗粒之间的空隙流出;而较小的分子则可进入孔隙,在柱内停留时间更长,从而实现分离。

该方法广泛应用于生物大分子如蛋白质、核酸等的纯化与分析,具有操作简便、分辨率高、对样品损伤小等优点。

凝胶层析原理总结表

项目 内容
名称 凝胶层析 / 凝胶过滤层析 / 排阻层析
原理 基于分子大小差异进行分离,大分子先出峰,小分子后出峰
固定相 多孔凝胶颗粒(如Sephadex、Sephacryl等)
流动相 缓冲液或其他适宜溶剂
分离机制 分子大小影响其进入凝胶孔隙的能力
适用对象 生物大分子(蛋白质、核酸、多糖等)
优点 操作简单、分辨率高、对样品无破坏
缺点 分辨率受凝胶孔径限制,不适合极小分子分离
典型应用 蛋白质纯化、分子量测定、脱盐、缓冲液交换

通过合理选择凝胶类型和实验条件,可以有效提高凝胶层析的分离效果,满足不同实验需求。

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