【凝胶层析原理】凝胶层析,又称凝胶过滤层析或排阻层析(Gel Filtration Chromatography),是一种基于分子大小差异进行分离的色谱技术。其基本原理是利用多孔凝胶颗粒作为固定相,样品中不同大小的分子在通过凝胶柱时,因进入凝胶孔隙的能力不同而被分离开来。较大的分子无法进入孔隙,直接通过凝胶颗粒之间的空隙流出;而较小的分子则可进入孔隙,在柱内停留时间更长,从而实现分离。
该方法广泛应用于生物大分子如蛋白质、核酸等的纯化与分析,具有操作简便、分辨率高、对样品损伤小等优点。
凝胶层析原理总结表
项目 | 内容 |
名称 | 凝胶层析 / 凝胶过滤层析 / 排阻层析 |
原理 | 基于分子大小差异进行分离,大分子先出峰,小分子后出峰 |
固定相 | 多孔凝胶颗粒(如Sephadex、Sephacryl等) |
流动相 | 缓冲液或其他适宜溶剂 |
分离机制 | 分子大小影响其进入凝胶孔隙的能力 |
适用对象 | 生物大分子(蛋白质、核酸、多糖等) |
优点 | 操作简单、分辨率高、对样品无破坏 |
缺点 | 分辨率受凝胶孔径限制,不适合极小分子分离 |
典型应用 | 蛋白质纯化、分子量测定、脱盐、缓冲液交换 |
通过合理选择凝胶类型和实验条件,可以有效提高凝胶层析的分离效果,满足不同实验需求。